阿魏菇多糖高产菌株筛选的离子束诱变和复合诱变对比研究

为筛选出阿魏菇菌丝体多糖高产菌株，本文进行了阿魏菇多糖高产菌株筛选的离子束诱变和复合诱变对比研究。尝试用打散的阿魏菇菌丝体为靶材，以离子束注入为诱变手段，通过营养缺陷型初筛和摇瓶发酵复筛，获得了2株阿魏菇多糖高产菌株PFPH-1和PFPH-2。其菌丝体多糖产量分别达到551．80mg，L和659．46mg／L，比出发菌株分别提高了46．55％和75．14％。再分别以PFPH．1和PFPH．2为出发菌株，用紫外线和氯化锂进行复合诱变处理，通过高通量初筛和摇瓶发酵复筛，结果发现，菌株1、9和10号比其出发菌株PFPH-1的多糖产量分别减少了27％、38％和37％；菌株17号比其出发菌株PFPH-2的多糖产量减少了28％。在本研究中，紫外线和氯化锂的复合诱变表现出了一定的负效应。     

产油脂和γ- 亚麻酸被孢霉M11 的诱变

为了提高被孢霉M11 的油脂与γ - 亚麻酸(GLA)含量,对M11 菌株分别进行紫外(UV)、硫酸二乙酯(DES)、紫外与硫酸二乙酯复合(UV-DES)诱变的研究。结果表明：UV、DES、UV-DES 复合诱变措施在一定程度上提高了突变菌株的油脂含量及GLA 含量,但复合诱变比单一诱变更有效。突变株M117 的油脂含量为41.3%,GLA 含量9.28%,GLA 产量1.52g/L,分别比出发菌株提高了11.26%、11.81% 和24.59%。经9 代连续传代培养,M117都能保持较稳定的产油和产γ - 亚麻酸能力。     

辅酶Q10 高产菌株的诱变选育

以豌豆根瘤菌(Rhizobium leguminosarum 1.1723)为出发菌株,利用紫外-LiCl和超声波进行诱变,以期获得高产辅酶Q10菌株。结果表明：1g/L LiCl诱变能显著提高菌株的正突变率,超声波诱变会引起细胞壁结构与构成发生改变。通过罗红霉素初筛和摇床复筛,获得辅酶Q10突变株C40-05,胞内辅酶Q10产量为1.198mg/g干菌,比出发菌株(0.389mg/g)提高了208%。菌株经5次传代培养,胞内辅酶Q10产量下降了2.67%,突变株遗传形状稳定,可作为辅酶Q10生产菌株。     

Thermococcus siculi HJ21 α - 淀粉酶Asp186定点突变对酶活性的影响

为确定超嗜热古菌Thermococcus siculi HJ21α-淀粉酶(TSA)中特定氨基酸及所在位点与酶活性间的关系,以含TSA基因的pEt-28a-His6质粒为模板,利用定点突变技术,将第186位点的天冬氨酸(Asp)突变为天冬酰胺(Asn),突变子转化至E. coli BL21(DE3)并经IPTG诱导表达,测定突变前后的酶活性,定点突变后的TSA无酶活性;采用DNAStar和Deepview蛋白分析软件,预测突变前后TSA蛋白的二级结构和三级结构,结果表明Thermococcus siculi HJ21α-淀粉酶的186位点对维持TSA的酶活性具有重要意义,它的突变导致酶蛋白二级结构组件及氢键网络的改变。     

EMS诱变甘蔗愈伤组织的初步研究

为了探索EMS对甘蔗愈伤组织进行化学诱变的合适浓度和时间组合,以ROC22和粤糖93-159甘蔗愈伤组织为材料,研究了不同浓度(8、24、40μmol/L)、不同时间(2、4、6 h)诱变处理对愈伤组织的每克鲜重相对增重量和相对分化率的影响。并通过分化试验选择适合诱变后愈伤组织分化的培养基。结果表明,适合诱变处理后愈伤组织分化的培养基为:MS基本培养基+2 mg/L KT+2 mg/L NAA+3.0%蔗糖(W/V)+0.8%琼脂(W/V)。适合EMS诱变甘蔗的处理为:24μmol/L诱变处理2 h或8μmol/L诱变处理6 h。     

紫外诱变选育耐酸酵母菌株及其特性研究

以实验室保存的耐酸酵母菌株YM1-1为出发菌株,在其对数生长期进行紫外诱变处理,经过三级筛选后,最终筛得一株在pH 1.8强酸环境中仍可存活的突变菌株YM1-1E。在其特性研究中发现,菌株YM1-1E最适生长温度和pH值分别为36 ℃和5.5,能耐受500 mg/L SO2、14%乙醇和65%的葡萄糖溶液。突变菌株YM1-1E在pH值为2.5的发酵培养基中发酵6 d后,发酵液酒精度为4.5%vol,糖醇转化率为46.39%,可溶性固形物含量为9.7%,较出发菌株YM1-1相比,产酒精能力提升了25%。     

高产辅酶Q10类球红细菌的化学诱变筛选及其发酵培养基优化

利用菌株对（维生素K3+叠氮化钠+对羟基苯甲酸）的复合抗性作为筛选标记,对产辅酶Q10的类球红细菌（Rhodobacter sphaeroides）使用亚硝基胍进行化学诱变,筛选高产菌株并采用响应面法优化其发酵培养基。结果表明,经诱变选育得到一株遗传稳定的辅酶Q10高产菌株R.sp3-7,其最佳发酵培养基组成为：葡萄糖31.7 g/L,玉米浆干粉5.6 g/L,（NH4）2SO4 5.3 g/L、谷氨酸钠 3.0 g/L、NaCl 3.0 g/L、MgSO4·7H2O 12.5 g/L、KH2PO4 3.0 g/L、CaCO3 2.0 g/L、辅液1 mL/L。在此培养条件下,诱变菌株R.sp3-7的辅酶Q10产量达（93.63±0.59） mg/L,与出发菌株相比提高了116.8%。 关键词：中图分类号：TS201.3 文章编号：0254-5071（20１6）06-0090-06 doi:     

复合诱变选育耐高温高产葡萄糖酸盐的黑曲霉菌株

以黑曲霉（Aspergillus niger）Y8为研究对象,经过紫外-高温复合诱变处理后,利用初筛及复筛,得到一株耐高温高产葡萄糖酸盐的黑曲霉菌株UT-1。菌株UT-1在45 ℃,220 r/min条件下进行摇瓶发酵,其平均产葡萄糖酸盐的量为（23.23±0.02） g/100 mL,较出发菌株提高了32.44%,经4次传代培养后,菌株UT-1遗传稳定性能良好。5 L发酵罐试验结果表明,菌株UT-1与出发菌株相比适应期缩短了2 h,发酵周期缩短了4 h,葡萄糖酸盐产量提高了17.14%,为葡萄糖酸盐工业化生产提供理论基础和技术支持。     

A potential contribution of the less negatively charged cell wall to the high aluminum tolerance of Rhodotorula taiwanensis RS1

Rhodotorula taiwanensis RS1 (Rt) is a high‐aluminum (Al)‐tolerant yeast that can survive Al at concentrations up to 200 mM. In this study, we compared Rt with an Al‐sensitive congeneric strain, R. mucilaginosa AKU 4812 (Rm) and Al sensitive mutant 1 (alsm1) of Rt, to explore the Al tolerance mechanisms of Rt. The growth of Rm was completely inhibited by 1 mM Al, but that of Rt was not inhibited until Al concentration was more than 70 mM. The growth of alsm1 was inhibited much more by 70 mM and 100 mM Al than that of Rt. Compared with Rm cells, Rt cells accumulated less Al in the cell wall and cytoplasm. A time‐course analysis showed that Al was absorbed by Rm cells much more rapidly than by Rt cells when exposed to the same Al concentration. Meanwhile, the Al content of alsm1 was higher than that of Rt. Although the cell wall of Rt was thicker than that of alsm1 and Rm under control and 0.1 mM Al, that of Rt was thinner than that of alsm1 under 70 mM Al despite that their cell walls were thickened. The alcian blue adsorption was lower and cell wall zeta‐potential was higher in Rt and alsm1 than in Rm, indicating a less negative charge of cell wall of Rt and alsm1 than that of Rm. Taken together, the less negatively charged cell wall of Rt may restrict the adsorption of cationic Al in cells, potentially contributing to its high Al tolerance. Copyright © 2016 John Wiley & Sons, Ltd.     

高产核酸的热带假丝酵母诱变选育及其发酵条件优化

以热带假丝酵母（Candida tropicalis）HY4-17为出发菌株,采用电子束辐射技术诱变,经过初筛、复筛及遗传稳定性试验选育核酸高产菌株,通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及响应面法优化培养基,并优化接种量和发酵时间以提高核酸产量。结果表明,获得一株生长快速,遗传稳定的突变菌株EBI-21,其核酸含量较出发菌株HY4-17提高了25%。最佳培养基组成为：糖蜜185 g/L,硫酸铵3 g/L,硫酸锌0.05 g/L,硫酸镁0.5 g/L,硫酸亚铁0.05 g/L,磷酸1 mL/L,pH值为4.5。在优化培养基及接种量8%,发酵时间12 h条件下,核酸产量达到1.73 g/L,较未优化前提高了80.21%,培养时间缩短了10 h。